【摘 要】
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目的采用煮沸法处理人宫颈黏液上皮细胞,获得人乳头瘤病毒(HPV)DNA,然后再通过应用可视化环介导等温扩增(LAMP)检测技术对HPV常见基因型16、58的2个亚型进行快速诊断,探讨HPV
【机 构】
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承德医学院病原生物学实验中心; 基础医学研究所; 承德医学院; 承德医学院附属医院;
【基金项目】
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河北省教育厅重点项目资金资助项目(项目编号：ZD2017101)
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目的采用煮沸法处理人宫颈黏液上皮细胞,获得人乳头瘤病毒(HPV)DNA,然后再通过应用可视化环介导等温扩增(LAMP)检测技术对HPV常见基因型16、58的2个亚型进行快速诊断,探讨HPV感染和分型的快速检测技术,以指导HPV感染患者的临床诊断和治疗。方法收集承德医学院妇科宫颈脱落细胞标本104例,采用直接煮沸法提取HPV DNA。应用LAMP及聚合酶链式反应(PCR)2种诊断技术进行检测,并在LAMP扩增体系中加入钙黄绿素使产物可视化。对检测结果进行特异性和敏感度比较,并计算kappa系数对校测结果的一致性进行分析。结果成功建立了HPV16、58的可视化LAMP体系,其特异性较好,且钙黄绿素产物与电泳结果一致,HPV16、58 LAMP检测限分别为100拷贝/管和103拷贝/管,与PCR一致性较好(kappa值>0.7)且无统计学差异(P>0.05)。结论 LAMP对未经纯化的HPV核酸具有较好特异性和敏感度,且操作简单,适合应用于基层。
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