重组大肠杆菌右旋糖酐蔗糖酶的纯化及其性质

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【目的】研究工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28-dexYG产右旋糖酐蔗糖酶的纯化和酶学性质。【方法】工程菌经过IPTG诱导后生产含His-tag融合蛋白的右旋糖酐蔗糖酶,通过硫酸铵沉淀、Ni-NTA亲和层析纯化,得到纯度较高的酶蛋白,并对纯酶进行了酶学性质及动力学研究。【结果】经过SDS-PAGE测得该酶的分子量约为170kDa,与理论推测值基本相同。以蔗糖为底物,酶促反应的最适温度为25~30℃,最适pH值为5.4,动力学常数Km值为10.43mmol/L;酶活在pH5.0~8.0较为稳
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