【摘 要】
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目的 分析ghrelin蛋白对小鼠脓毒症肺损伤焦亡通路及炎症因子表达的影响,探讨其在脓毒症肺损伤中的保护机制.方法 将健康雄性C57BL/6小鼠180只,分为假手术组(sham,n=24)、盲
【机 构】
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400014 重庆,重庆医科大学附属儿童医院急诊科;400014 重庆,重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究教育部重点实验室,国家儿童健康与疾病临床医学研究中心;400014 重庆,重庆医科大学附
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目的 分析ghrelin蛋白对小鼠脓毒症肺损伤焦亡通路及炎症因子表达的影响,探讨其在脓毒症肺损伤中的保护机制.方法 将健康雄性C57BL/6小鼠180只,分为假手术组(sham,n=24)、盲肠结扎穿刺模型组(the cecal ligation and puncture CLP,n=78)和ghrelin组(n=78).使用盲肠结扎穿刺法建立脓毒症模型,ghrelin组于造模后3、20 h腹腔各给药ghrelin 12 nmol/kg,其他组给予等量生理盐水.观察各组120 h的生存率,分别留取术后6、12、24 h CLP组、ghrelin组和24 h sham组小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)以及肺组织,检测BALF中总蛋白浓度和细胞总数,ELISA法检测ghrelin、IL-10、IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18,免疫荧光染色法检测GSDMD表达,qPCR、Western blot检测焦亡信号通路NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达.结果 与sham组比较,CLP组的死亡率、肺组织病理改变以及炎症因子(IL-10、IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18)明显升高(P＜0.05);肺组织ghrelin水平降低,NLRP3、ASC、Caspase-1和GSDMD蛋白水平明显升高(P＜0.05).给予外源性ghrelin后,ghrelin组小鼠死亡率降低,肺组织病理结构损害减轻,炎症因子以及NLRP3、ASC、Caspase-1和GSDMD蛋白水平表达降低(P＜0.05).结论 ghrelin改善脓毒症肺损伤小鼠生存率,减轻肺组织病理学改变,可能通过抑制焦亡途径、降低炎症反应等发挥保护作用.
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