【摘 要】
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目的 研究HBV干预后小鼠肝脏树突状细胞P-干扰素调节因子3及其下游Ⅰ型干扰素表达的变化.方法用免疫磁珠分选法分离肝脏树突状细胞,并用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞
【机 构】
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复旦大学附属华山医院感染病科,上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心重症肝病&ICU科
【基金项目】
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上海市科委基础研究重点项目;国家重点基础研究发展规划(973计划);上海市公共卫生优秀学科带头人培养计划资助项目;国家重大科技专项项目
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目的 研究HBV干预后小鼠肝脏树突状细胞P-干扰素调节因子3及其下游Ⅰ型干扰素表达的变化.方法用免疫磁珠分选法分离肝脏树突状细胞,并用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4在24孔板中诱导培养.用超离心技术获得HBV,并用实时荧光定量PCR检测.第5天将培养的树突状细胞分为2组:HBV组与HBV共同培养,对照组加入等量的细胞培养液.24 h后,两组均加入聚肌胞刺激,收集0、1、2、6、24 h的细胞和上清液,用Western blot检测P-干扰素调节因子3的表达情况,用酶联免疫吸附法检测上清液中干扰素β的浓度.组间比较用t检验.结果 0h时HBV组培养液上清液干扰素β浓度[(12.38 ±3.71)pg/ml]与对照组[(10.83±4.11)pg/ml]比较,差异无统计学意义(P>0.05).聚肌胞刺激后6 h,HBV组培养液上清液干扰素β浓度[(88.67±9.01)pg/ml]与对照组[(137.68±12.28)pg/ml]比较,t=9.653,P0.05).聚肌胞刺激小鼠肝脏树突状细胞后P-干扰素调节因子3表达逐渐增强.经HBV干预在感染时病毒与细胞数量的比值为25,24 h后再用聚肌胞刺激2 h,HBV组P-干扰素调节因子3表达较对照组减弱.结论 HBV干预后小鼠肝脏树突状细胞P-干扰素调节因子3及其下游Ⅰ型干扰素表达均下调.
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