目的构建唾液酸合成酶基因1(neuB1)失活、脂多糖(LPS)中唾液酸(SA)缺失的空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni,Cj)O∶19突变株,以确认CjLPS中,含SA基团的终端GM1样结构在Cj相关格林-巴利综合征(GBS)发病机理中的关键作用。方法从已有neuB1基因失活的Cj肠炎相关菌株O∶2DNA中,将含卡那霉素抗性基因(KmRcassette)的neuB1突变片段———neuB1::KmR克隆到pGEM-T载体,形成突变载体pGEM-neuB1::KmR,进一步转化到与GBS相关的CjO∶19野生株,获得CjO∶19突变株,行PCR和RT-PCR鉴定。SDS-PAGE分析CjLPS,过碘酸-间苯二酚和酸性茚三酮反应法分别检测CjLPS中SA。霍乱毒素B亚单位(CTB)结合反应检测Cj菌体裂解物及LPS中神经节苷脂GM1模拟结构。最后以突变株及其同源野生株LPS为抗原分别免疫豚鼠,第5周取坐骨神经原纤维分离。结果neuB1基因突变片段———neuB1::KmR成功克隆到pGEM-T载体中,进而构建得neuB1基因失活的Cj突变株。后者LPS已丧失SA基团且不能与CTB结合,表明其菌体裂解物和LPS中已不存在GM1模拟结构。野生株LPS免疫组中,17.3%的坐骨神经原纤维发生免疫性损伤,明显高于PBS对照组(1.6%)和突变株LPS免疫组(2.4%);而突变株LPS免疫组与PBS对照组间差异无统计学意义。结论成功构建neuB1基因失活的CjO∶19突变株,其LPS已缺失野生株所具有的SA基团及与GM1的分子模拟特性,且不能再诱导活体动物的周围神经免疫性损伤,有力证实了关于CjLPS诱发GBS的分子模拟推论,SA是该交叉免疫反应中抗原的重要成分。