【摘 要】
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为了实现非洲猪瘟病毒（African swine fever virus， ASFV）的快速检测，本研究建立了检测ASFV K196R基因的qPCR方法。按照K196R基因保守序列，设计1对特异性引物，建立并优化qPCR反应体系和反应条件，构建标准曲线，测定该检测方法的特异性、灵敏性和可重复性。结果显示，本研究建立的检测方法不与其他病毒的核酸样品产生交叉反应，检测灵敏度达10 copies/μL。
【基金项目】
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国家自然科学基金专项项目（31941001）；
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为了实现非洲猪瘟病毒（African swine fever virus， ASFV）的快速检测，本研究建立了检测ASFV K196R基因的qPCR方法。按照K196R基因保守序列，设计1对特异性引物，建立并优化qPCR反应体系和反应条件，构建标准曲线，测定该检测方法的特异性、灵敏性和可重复性。结果显示，本研究建立的检测方法不与其他病毒的核酸样品产生交叉反应，检测灵敏度达10 copies/μL。变异系数小于2.5%，构建的标准曲线线性关系良好。上述结果表明，该检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好，能够为ASF疫情防控提供技术支撑。
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为建立快速、敏感、特异的非洲猪瘟病毒（ASFV）双重荧光PCR检测方法，本研究根据NCBI中登录的ASFV P72基因序列，设计了 1对特异性引物和2条探针，通过优化反应条件，建立了ASFV双重荧光PCR检测方法。结果显示，该方法特异性好，不与其他常见猪病病原体发生交叉反应，FAM和HEX荧光通道对质粒标准品的最低检测限度均为9.5 copies/μL。上述结果表明，本研究建立的ASFV双重荧光P
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