【摘 要】
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[徐俊荣,张沥,闫小君,崔大祥,江红,韩锋产.世界华人消化杂志,2001;9(3):308-311]rn目的用PCR方法扩增幽门螺杆菌(Hp)尿素酶C基因,以构建Hp UreC基因的重组克隆,为进一步表达H
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[徐俊荣,张沥,闫小君,崔大祥,江红,韩锋产.世界华人消化杂志,2001;9(3):308-311]rn目的用PCR方法扩增幽门螺杆菌(Hp)尿素酶C基因,以构建Hp UreC基因的重组克隆,为进一步表达Hp UreC基因的重组蛋白质并研究其功能奠定基础.方法以Hp临床菌株总DNA为模板,根据已发表的Hp UreC基因序列设计引物(位于588 bp～605 bp和1 737 bp～1754 bp),采用PCR方法扩增出一个1173 bp的Hp尿素酶C基因片段,用BamHI及EcoRI双酶切后将其克隆入测序质粒pGEM-3Zf(-)中,以全自动测序仪双向测定目的片段序列,借助于DNA TOOL 5.1拼接成完整序列.与已知的Hp UreC基因序列做比较.结果所得核酸序列与报道的Hp国际标准菌株M60398的UreC基因同源性为95%.根据测序结果推断其编码的氨基酸序列,并行BLAST分析,发现它与标准菌株M60398的氨基酸序列同源性为97%.结论成功构建了Hp UreC基因的重组克隆,为进一步研究表达Hp UreC基因的重组蛋白质并研究其功能奠定了基础. (潘伯荣)rn
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