海参脑苷脂对前脂肪细胞分化的抑制作用及机制

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目的 探究海参脑苷脂在3T3-L1细胞增殖以及分化过程中发挥的作用,并研究其具体机理。方法运用噻唑蓝(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)法探究海参脑苷脂在3T3-L1细胞正常生长过程中发挥的作用;并通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)实验探究海参脑苷脂对前脂肪细胞是否存在毒性作用;诱导3T3-L1细胞为成熟细胞,采用油红O法以及测定成熟脂肪细胞中甘油三酯(Triglyceride,TG)的含量来探究海参脑苷脂是否会改变脂肪细胞的脂质积累情况;q RT-PCR法测定过氧化物酶体增殖物受体(peroxisome proliferator-activated receptorgamma,PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)以及Wnt/β-catenin通路相关基因的表达水平。通过Western Blotting方法测定β-catenin蛋白向核内转移的情况。结果 海参脑苷脂能明显抑制3T3-L1细胞的增殖以及分化,且对细胞无毒性作用(P<0.01)。q RT-PCR结果显示,海参脑苷脂可明显抑制脂肪细胞PPARγ和C/EBPα以及Wnt/β-catenin通路相关基因的表达(P<0.01)。Western Blotting结果表明,海参脑苷脂可以明显提高脂肪细胞核内β-catenin蛋白的表达水平(P<0.01)。结论 海参脑苷脂可以明显的抑制3T3-L1细胞的增殖以及分化,产生这种效果的机理和转录因子PPAR-γ、C/EBP-α以及Wnt/β-catenin通路相关。
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