肿瘤凋亡相关分子CD59突变体的构建及作用研究

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目的构建CD59第40位氨基酸突变的重组体,研究Hela细胞中CD59基因突变引起肿瘤逃逸相关分子caspase-3表达量的变化。方法采用重组聚合酶链反应定点诱变技术构建第40位氨基酸突变的CD59,克隆人pALTER-MAX质粒,采用阳离子脂质体法将重组质粒转染Hela细胞。G418筛选稳定表达细胞克隆,免疫酶标、免疫荧光、ELISA筛选出高表达CD59的细胞株,用免疫组化法检测转染前后Hela细胞内caspase-3表达量的变化。结果①酶切鉴定和序列测定均证实成功构建了CD59第40位氨基酸突变的重组
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