根霉凝乳酶的分离纯化及其酶学特性研究

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采用70%乙醇对凝乳酶进行粗提,回收率为52.65%。采用DE-52和SephadexG-75柱进行纯化,经冷冻干燥成酶粉,其活力1813.74U/mg,回收率为11.25%。该酶的最适反应pH为5.7,在pH5~7.5范围酶活力保持稳定;最适反应温度45℃,60℃保持20min,酶完全失活。Ca2+、Fe2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+、Al3+对该酶的活力有不同程度的促进作用,其中以Al3+和Ca2+的促进作用最显著,Na+和K+对该酶的活力有抑制作用。通过SDS-PAGE测定,该酶的分子质量约35kDa。
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