狂犬病毒重组致病株Mu11的定点回复突变及生长特性的研究

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sundianjusdyg
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狂犬病毒GX074株于2003年自广西健康犬脑分离得到,将其G蛋白第253、 263、 273位氨基酸通过反向遗传学技术替换到弱毒疫苗株rRC-HL对应位点得到重组毒株Mu11。为验证G蛋白第253、 263、 273位氨基酸对狂犬病毒的生长特性的影响,本研究以Mu11株的感染性cDNA克隆质粒为基础,将Mu11株G蛋白第253、 263、 273位氨基酸回复突变为亲本弱毒株rRC-HL的对应氨基酸,得到突变病毒株Mu11R253.263.273。应用间接免疫荧光实验及对拯救病毒基因测序,证明Mu11R253.263.273毒株突变位点正确。通过对其病毒滴度和多步生长曲线的测定,证明突变病毒株Mu11R253.263.273基因组稳定,在细胞中的复制能力与亲本弱毒株rRC-HL一致。研究表明狂犬病毒G蛋白253、 263、 273位氨基酸对Mu11和亲本强毒GX074的生长特性具有重要影响,为进一步对其致病性功能的研究提供科学依据。
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