目的 探讨结合肿瘤特异性启动子hTERTp和特异性抑癌基因Apoptin的腺病毒AdhTERTp-E1 a-A poptin (Ad-VT)对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用. 方法 于96孔板内制备前列腺癌PC-3单层细胞(5×103个/孔),分别用100个感染复数(multiplicity of infection,M OI)、10 MOI和1 M0I的重组腺病毒Ad-VT、Ad-CMV-Apoptin(Ad-VP3)、Ad-hTERTp-El a-EGFP (Ad-GT)和Ad-CMV-EGFP(Ad-EGFP)进行感染,以未感染孔为对照,每个剂量设3个复孔.采用96 h噻唑盐(MTT)法,检测重组腺病毒对PC-3细胞的抑制作用.于6孔板制备PC-3单层细胞(1 × 106个/孔),分别用100 MOI的Ad-VT、Ad-VP3、Ad-GT和Ad-EGFP感染PC-3细胞,培养48 h后,分别应用AO/EB染色法、DAPI染色法、Annexin V检测法对PC-3细胞进行染色,在显微镜下观察细胞形态,分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式；应用Caspase检测法对PC-3细胞提取总蛋白,检测Caspase酶活性,分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式. 结果 MTT法结果显示除Ad-EGFP外,Ad-VT、Ad-VP3和Ad-GT均 不同程度地表现出对PC-3细胞的抑制作用,其中Ad-VT、Ad-GT的抑制作用强于Ad-VP3,差异有统计学意义(P＜0.05)；培养48、72、96 h,随着MOI的增高,Ad-VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定剂量效应关系趋势,感染剂量为100 MOI时,Ad-VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定时间效应关系趋势.通过AO/EB、DAPI、Annexin V检测法和Caspase酶活性检测结果显示,Ad-VT可通过诱导PC-3细胞的凋亡抑制PC-3细胞的增殖.其中AO/EB染色可观测到经Ad-VT感染的PC-3细胞呈现橘红色；DAPI染色可观测到经Ad-VT感染的PC-3细胞细胞核呈现亮蓝色,且存在核内物质碎裂；Annexin V检测法可观测到经Ad-VT感染的PC-3细胞出现磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加等凋亡特征；Caspase检测结果显示Ad-VT可明显上调Caspase2、3、6、8、9酶的活性. 结论 结合肿瘤特异性启动子hTERTp和特异性抑癌基因Apoptin的腺病毒Ad-VT通过细胞凋亡能有效地抑制前列腺癌PC-3细胞的生长。