【摘 要】
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目的：筛选与克隆重组人肝再生增强因子激活基因，了解其在体内的调节功能线索及机制．方法：应用大肠杆菌系统，表达、纯化重组人肝再生增强因子蛋白．刺激HepG2细胞，以溶剂：PH7．8的磷酸盐
【机 构】
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中国人民解放军302医院传染病研究所基因治疗研究中心
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目的：筛选与克隆重组人肝再生增强因子激活基因，了解其在体内的调节功能线索及机制．方法：应用大肠杆菌系统，表达、纯化重组人肝再生增强因子蛋白．刺激HepG2细胞，以溶剂：PH7．8的磷酸盐缓冲液为平行对照，制备转染后的细胞裂解液，提取mRNA并逆转录为cDNA，经：Rsa Ⅰ酶切后，将实验组cDNA分成两组，分别与两种不同的接头衔接，再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR)，将产物与T／A载体连接，构建cDNA消减文库，并转染大肠杆菌进行文库扩增，随机挑选克隆．PCR扩增后进行测
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