【摘 要】
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目的 探讨宫颈上皮内瘤变和宫颈癌与内质网蛋白57(ERp57)基因启动子区甲基化水平的关系和意义.方法 应用MethPrimers软件设计ERp57基因启动子区CpG岛特异性PCR引物,对宫颈癌SiHa细胞DNA进行亚硫酸氢盐修饰、目的片段扩增、质粒载体克隆和测序,确定目的片段所含CpG序列甲基化情况.收集15例正常宫颈上皮(对照组)、30例宫颈上皮内瘤变(CIN组)和33例宫颈鳞癌(CSCC组)
【机 构】
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(830011乌鲁木齐,新疆医科大学第一附属医院肿瘤科),(830011乌鲁木齐,新疆医科大学第一附属医院病理科),(新疆医科大学病理教研室),(新疆医科大学生物化学教研室),(新疆医科大学病理教研室
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目的 探讨宫颈上皮内瘤变和宫颈癌与内质网蛋白57(ERp57)基因启动子区甲基化水平的关系和意义.方法 应用MethPrimers软件设计ERp57基因启动子区CpG岛特异性PCR引物,对宫颈癌SiHa细胞DNA进行亚硫酸氢盐修饰、目的片段扩增、质粒载体克隆和测序,确定目的片段所含CpG序列甲基化情况.收集15例正常宫颈上皮(对照组)、30例宫颈上皮内瘤变(CIN组)和33例宫颈鳞癌(CSCC组)患者的新鲜组织标本,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDITOF)技术定量分析宫颈病变组织DNA ERp57基因启动子单一CpG位点的甲基化水平.结果 ERp57基因相应目的片段各含9个CpG位点,在宫颈癌SiHa细胞基因组DNA中,所有的CpG位点都发生了甲基化,甲基化率为100％.MALDI-TOF检测结果显示,在CSCC组中,CpG_1、CpG_5和CpG_7位点的甲基化水平分别为0.9021±0.1810、0.8521±0.1696和0.9671 ±0.1425,对照组分别为0.7721±0.0644、0.7347±0.0924和0.8765±0.0226,差异均有统计学意义(均P＜0.05).CSCC组、CIN组和对照组宫颈组织ERp57基因的甲基化水平分别为0.9065±0.3709、0.8697±0.3336和0.8040±0.4705,差异无统计学意义(P =0.052).结论 维吾尔族妇女宫颈病变组织中,ERp57基因启动子某些单个CpG位点发生甲基化后,引起该基因转录下调,其位点可能是关键性CpG位点.
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