【摘 要】
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目的：利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除CBX2基因的A549细胞系。方法：设计针对敲除CBX2的short guide RNA（sg RNA）,并克隆到载体PX459中。将测序正确的重组质粒转染到A549细胞中,
【机 构】
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天津医科大学生物化学与分子生物学系
【基金项目】
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天津市应用基础与前沿技术研究计划一般项目(14JCYBJC26000)
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目的：利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除CBX2基因的A549细胞系。方法：设计针对敲除CBX2的short guide RNA（sg RNA）,并克隆到载体PX459中。将测序正确的重组质粒转染到A549细胞中,利用嘌呤霉素筛选转染阳性细胞并分离得到5个单克隆细胞系,通过Western blot方法检测构建的细胞系中CBX2蛋白表达情况。结果：成功构建了靶向CBX2的CRISPR/Cas9重组质粒,筛选出的5个单克隆细胞系中CBX2蛋白表达水平均显著下降。结论：成功利用CRISPR/Cas9系统
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