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目的:建立血管内皮细胞体外培养的模型,为研究内皮细胞提供重要的实验方法。方法:采用0.1%Ⅰ型胶原酶消化灌注脐静脉,在37℃水浴箱内孵育18~20rain,离心后向沉淀内加入L-DMEM培养液(含10mg/L内皮细胞生长因子),吹打成单细胞悬液,放入预铺1.5%明胶的培养瓶内,在CO2培养箱中培养,48h后换液1次,以后每2—3d换液1次,每天在倒置相差显微镜下观察细胞,免疫组织化学法进行Ⅷ因子相关抗原鉴定。结果:经胶原酶消化法获得的细胞经过镜下观察和Ⅷ因子相关抗原鉴定证明是脐静脉内皮细胞。结论:用胶原酶