电穿孔转染制备绵羊诱导多潜能干细胞条件的优化

来源 :西北农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qijing1

【摘要】

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为优化获得绵羊诱导性多潜能干细胞（iPS cell）的诱导条件，通过4-D电转染仪，将含有人Oct4、Soac2及KIf4、cMyc及gin28基因的3个质粒共转染绵羊成纤维细胞，从EH-100、EN150、CZ-167

【作者】

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王聪慧赵帅张译元王立民李炜杰赵兴旺丁新平张银国

【机构】

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石河子大学动物科技学院,新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,石河子市石总场畜牧兽医服务中心,新疆西部牧业股份有限公司紫泥泉种羊场

【出处】

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西北农业学报

【发表日期】

：

2015年9期

【关键词】

：

电穿孔转染绵羊成纤维细胞诱导性多潜能性干细胞 Electroporation Sheep fibroblasts Induced pluripotent

【基金项目】

：

兵团种质资源创新专项（2012BB042）,国家转基因重大专项（2014ZX08008001）,新疆生产建设兵团院士资金专项（2012BB024和2014BR023）,新疆农垦科学院引导计划（49YYD201209）.

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为优化获得绵羊诱导性多潜能干细胞（iPS cell）的诱导条件，通过4-D电转染仪，将含有人Oct4、Soac2及KIf4、cMyc及gin28基因的3个质粒共转染绵羊成纤维细胞，从EH-100、EN150、CZ-167、CA137电转程序筛选出适合绵羊成纤维细胞的电转染程序；探讨不同细胞密度、质粒质量浓度、质粒质量浓度比及维生素c对诱导性多潜能干细胞克隆形成的影响。结果表明，采用EH100电转程序，在细胞密度为5×10^6mL-1、质粒质量浓度比为1：1：1、质粒总质量浓度为0．1mg

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