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目的 构建表达单纯疱疹病毒1型糖蛋白D的DNA疫苗。方法 采用聚合酶链式反应（PCR），从HSV-1基因组中扩增出gD基因，插入中间载体pGEM-T，然后克隆入真核表达载体pcDNA3.1，构建重组质粒pLy-D，经部分测序和限制性内切酶分析证实，将pLy-D转染Cos-7细胞，并肌肉接种ICR小鼠。用免疫组化和ELISA方法分别检测gD蛋白表达及小鼠血清中的特异性抗体。结果 转染的Cos-7细胞中有gD蛋白的表达；经三次肌肉免疫接种的小鼠血清中有特异性HSV-1抗体产生，结论 本研究构建的重组质粒pL