【摘 要】
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目的:提高大鼠原代结肠平滑肌细胞(CSMCs)培养方法的实用性及操作性。方法:结肠平滑肌剪碎,37℃0. 25%胰蛋白酶消化30 min,离心,25%胎牛血清(FBS)原代培养,20%FBS传代培养,免
【机 构】
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贵州中医药大学研究生院; 贵州中医药大学第二附属医院; 贵州省毕节市中医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（编号：8166150749）;贵州省科学技术厅资助项目（编号：黔科合LH[2015]7260号）;贵州省中医药管理局中医药、民族医药资助项目（编号：QZYY-2018-058）
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目的:提高大鼠原代结肠平滑肌细胞(CSMCs)培养方法的实用性及操作性。方法:结肠平滑肌剪碎,37℃0. 25%胰蛋白酶消化30 min,离心,25%胎牛血清(FBS)原代培养,20%FBS传代培养,免疫组织化学法鉴定。结果:原代培养第3天结肠平滑肌细胞贴壁生长及组织块周围细胞游离并生长,第7天生长密集,第9天细胞生长"峰-谷"状。传代培养第2天细胞贴壁,第7天见CSMCs增殖明显,第9天细胞平行生长,呈"峰-谷"状。对第3代CSMCs复苏后第2天少许细胞开始贴壁生长;第8天细胞增殖明显;第14天可见细胞呈亚融合状态。免疫组化鉴定CSMCs胞质为棕黄色,见与细胞长轴平行的α-肌动蛋白纤维细丝,阳性表达的细胞达95%以上。结论:CSMCs简化培养,操作简单易行,值得推广。
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