【摘 要】
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转染促甲状腺素受体(TSHR) shRNA的3T3-L1脂肪细胞以牛促甲状腺素(TSH)刺激,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养基中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western印迹法检测胰岛素受体底物1(IRS-1)的蛋白表达,免疫沉淀法检测IRS-1酪氨酸磷酸化.结果显示,1 mIU/ml TSH明显增加3T3-L1脂肪细胞TNF-α分泌[(341.85±12.00对522.67±36.2
【机 构】
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300070天津医科大学代谢病医院内分泌研究所,卫生部激素与发育重点实验室,300070天津医科大学代谢病医院内分泌研究所,卫生部激素与发育重点实验室,300070天津医科大学代谢病医院内分泌研究所,
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转染促甲状腺素受体(TSHR) shRNA的3T3-L1脂肪细胞以牛促甲状腺素(TSH)刺激,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养基中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western印迹法检测胰岛素受体底物1(IRS-1)的蛋白表达,免疫沉淀法检测IRS-1酪氨酸磷酸化.结果显示,1 mIU/ml TSH明显增加3T3-L1脂肪细胞TNF-α分泌[(341.85±12.00对522.67±36.22)ng/L,P＜0.01];随着TSH刺激浓度的增加,IRS-1蛋白表达及其酪氨酸磷酸化明显降低(均P＜0.01),而以RNA干扰下调TSHR后上述作用消失.另外,TNF-α拮抗剂WP9QY也可逆转TSH对IRS-1的下调作用.这些结果提示TSH与3T3-L1脂肪细胞表面TSHR结合后,可能通过促进TNF-α分泌进而下调IRS-1的表达及其酪氨酸磷酸化,而参与胰岛素抵抗的发生。
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