【摘 要】
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目的 探讨大蒜素改善高糖诱导的人腹膜间皮细胞-间充质转化的相关机制。方法 培养人腹膜间皮细胞（humanperitonealmesothelialcells，HPMCs）后将其进行两次分组，分组1：①对照组；②8.5mmol/LD-葡萄糖诱导组（8.5mmol/LDG组）；③17mmol/LD-葡萄糖诱导组（17mmol/LDG组）；④34mmol/LD-葡萄糖诱导组（34mmol/LDG组）；⑤
【基金项目】
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四川省肾脏疾病临床医学研究中心2020年度开放课题（2019YFS0537-16）；
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目的 探讨大蒜素改善高糖诱导的人腹膜间皮细胞-间充质转化的相关机制。方法 培养人腹膜间皮细胞（humanperitonealmesothelialcells，HPMCs）后将其进行两次分组，分组1：①对照组；②8.5mmol/LD-葡萄糖诱导组（8.5mmol/LDG组）；③17mmol/LD-葡萄糖诱导组（17mmol/LDG组）；④34mmol/LD-葡萄糖诱导组（34mmol/LDG组）；⑤68mmol/LD-葡萄糖诱导组（68mmol/LDG组）。其中除对照组外，其余组合分别用8.5、17、34、68mmol/L的D-葡萄糖诱导48h。分组2：①对照组；②34mmol/LD-葡萄糖诱导组（HG组）；③34mmol/LD-葡萄糖+低剂量大蒜素诱导组（AL-L组）；④34mmol/LD-葡萄糖+中剂量大蒜素诱导组（AL-M组）；⑤34mmol/L-葡萄糖+高剂量大蒜素诱导组（AL-H组）；⑥34mmol/LD-葡萄糖+JAK2抑制剂诱导组（JAK2组）。其中HG组用34mmol/L的D-葡萄糖诱导48h，AL-L组、AL-M组、AL-H组用34mmol/L的D-葡萄糖预处理6h后分别用10、20和40ng/mL大蒜素诱导48h，JAK2组加入1μmol/LAG490预处理6h后用34mmol/L的D-葡萄糖诱导48h。ELISA检测HPMCs上清的IL-6、TNF-α和IL-1β的含量；CCK-8检测细胞增殖并观察形态；Westernblot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin、α-SMA、MCP-1、p65、p-p65蛋白的表达情况。结果 与对照组相比，高糖诱导组HPMCs的相对存活率明显降低（P＜0.01），细胞形态表现异常，促进上皮细胞-间充质转分化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）发生的α-SMA、N-cadherin和Vimentin表达明显上调，抑制EMT发生的E-cadherin蛋白表达明显下调，JAK2/STAT3信号通路被激活从而导致EMT的发生（P＜0.01）；而大蒜素能明显促进高糖诱导后的HPMCs增殖，恢复异常的细胞形态，调节与EMT发生的相关蛋白水平从而改善HPMCs的上皮间质转分化；与高糖诱导组相比，大蒜素处理组HPMCs的促炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α明显降低，促炎症蛋白p-p50和MCP1表达明显下调，表明大蒜素能改善EMT引起的炎症。结论 大蒜素可通过抑制JAK2/STAT3信号通路调节EMT发生的标志蛋白、炎症信号蛋白及炎症因子水平从而改善高糖诱导的EMT及炎症。
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