结核分支杆菌CFP10/pET32a重组质粒的构建、原核表达及纯化

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目的构建结核分支杆菌重组CFP10/pET32a表达质粒,原核表达及纯化重组蛋白。方法将目的基因CFP10亚克隆到pET32a表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3)plysS,鉴定后以IPTG诱导表达,通过SDS—PAGE检测其表达水平,经含Ni^2+的His—bind树脂柱纯化CFP10。结果菌落PCR鉴定及测序分析表明,成功构建CFP10/pET32a重组质粒;IPTG诱导表达后,融合蛋白占菌体总蛋白的40%,占裂解物上清总蛋白的72.4%,表明重组的CFP10基因能在BL21中高效表达,表达的蛋
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