幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagM基因的克隆、表达及抗体制备

来源 :江苏大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tzmming123321
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目的:构建表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC 11637 IV型分泌系统cagM(HP0537)全长编码基因的原核表达载体,分析其抗原性并制备抗体。方法:应用PCR技术从H.pylori基因组扩增cagM基因片段,TA克隆后测序分析,并构建表达载体pET-28a(+)-cagM,转化E.coliBL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE及鉴定表达蛋白,表达蛋白以Ni2+-NTA柱进行纯化,用软件分析其抗原性后,免疫家兔制备多克隆抗体,ELISA检测多克隆抗
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