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试验应用淋巴细胞杂交瘤技术，以制备的P4免疫抗原免疫Balb／c小鼠为试验动物，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，经间接ELISA方法进行筛选，采用有限稀释法进行细胞克隆，经过3次克隆筛选，最终获得2株能稳定分泌P4单克隆抗体的杂交瘤细胞系，分别命名为8G6、11A11。杂交瘤细胞培养上清液和小鼠腹水中2株单抗ELISA效价分别为1：512000，1：216000。单克隆抗体与检测抗原和对照均不发生交叉反应，显示出良好的特异性，灵敏度高，且8G6的亲和力优于11A11。奶牛孕酮单克隆抗体的获得为P4检测