核酸疫苗pVAX1-F的构建及瞬时表达

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目的:构建仙台病毒核酸疫苗pVAX1-F,并在COS7细胞中表达。方法:利用PCR法以仙台病毒cDNA为模板扩增出F基因,与pMD18-T连接,测序正确后用Hind Ⅲ/EcoR Ⅰ双酶切,将F基因引入经同样酶切的pVAX1载体,构建pVAX1-F表达载体,用PCR法和双酶切法鉴定,并将此重组质粒通过脂质体介导转染COS7细胞,流式细胞术检测抗原蛋白表达、RT-PCR法检测外源基因的表达。结果:经PCR法和酶切鉴定,目的片段大小与预期相符,经测序目的基因序列与GenBank(EF679198)公布结果一致
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