杜仲Fls基因的克隆及原核表达

来源 :西北农林科技大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhouweijmu
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【目的】克隆杜仲黄酮醇合成酶基因(Fls)全长,对其开放阅读框(ORF)进行原核表达分析。【方法】以杜仲叶片为材料提取总 RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和 cDNA 末端快速扩增(RACE)技术克隆杜仲Fls基因;Fls基因的 ORF 经限制性内切酶酶切,构建其原核表达载体 pET-28a-Fls;最后利用 IPTG 诱导Fls基因在大肠杆菌 BL21(DE3)中表达。【结果】获得了黄酮醇合成酶基因全长序列,长度为1 220 bp,ORF 为1 011 bp,编码336个氨基酸;成功构建
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