【摘 要】
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目的建立灵敏、快速、特异的PCR-ELISA检测结核菌DNA的方法. 方法用一对生物素标记的上游引物和未标记的下游引物对TB IS6110的一段DNA进行快速PCR扩增,使扩增产物的一条链上
【机 构】
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第四军医大学全军基因诊断技术研究所,福建省晋江医院检验科
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目的建立灵敏、快速、特异的PCR-ELISA检测结核菌DNA的方法. 方法用一对生物素标记的上游引物和未标记的下游引物对TB IS6110的一段DNA进行快速PCR扩增,使扩增产物的一条链上带有生物素,同时PCR反应液中存在有地高辛的标记的检测探针,随着PCR的结束,探针与生物素标记的扩增产物形成特异的杂交体,该杂交体通过链霉亲和素被固定在微孔板表面. 然后用标记有过氧化物酶的地高辛抗体与杂交体上的地高辛结合,漂洗后加底物显色,测定吸光度值(A450 nm). 结果该方法灵敏、特异、快速 ,可以检测出10
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