【摘 要】
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为了探讨人白细胞介素(hIL)-18基因转导的抗肿瘤作用,构建了hIL-18 cDNA真核表达质粒载体pcDNA3/hIL-18.将pcDNA3/hIL-18经脂质体包裹,按照100μg/只的剂量注射入雄性Balb/c
【机 构】
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空军总医院临床分子生物学研究中心基因治疗研究室,
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为了探讨人白细胞介素(hIL)-18基因转导的抗肿瘤作用,构建了hIL-18 cDNA真核表达质粒载体pcDNA3/hIL-18.将pcDNA3/hIL-18经脂质体包裹,按照100μg/只的剂量注射入雄性Balb/c小鼠后肢肌肉,在设定时间处死小鼠取注射部位肉提取总RNA,应用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化法检测了hIL-18 mRNA及其蛋白质在小鼠肌肉中不同时间点的表达水平.随后30只雄性Balb/c小鼠于基因注射后第7 d腹部皮下(i.d.)或腹腔内(i.p.)接种1×105个同系小鼠S-180肉瘤细胞.观察了S-180肿瘤细胞在腹腔及皮下的生长情况、小鼠体重、肿瘤重量及存活时间.结果发现,pcDNA3/hIL-18注射后2 d能检测到hIL-18 mRNA表达,第7 d表达量较高,第28 d仍有hIL-18 mRNA表达.免疫组化染色显示了注射部位散在有hIL-18蛋白质颗粒.hIL-18基因注射组小鼠体重、肿瘤重量均比对照组轻(P值分别小于0.005、0.05),存活时间比对照组延长.结果显示,真核表达系统pcDNA3/hIL-18经脂质体包裹肌注后能有效表达,具有明显的抑制肿瘤生长作用.
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