重组人肽抗生素hPAB-β的初步纯化

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:durrenchen
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目的 探索重组人肽抗生素hPAB-β的纯化工艺,为制备高纯度、高活性的重组hPAB-β奠定基础。方法 将构建的含pQE32-CP-hPAB-β重组质粒的基因工程菌扩大培养,诱导表达后所得菌体经溶菌酶法裂解,鉴定融合蛋白表达形式;以含融合蛋白的溶液作为纯化的初始样品,采用Ni-NTA resin亲和层析柱对融合蛋白进行纯化,用CNBr裂解,利用Sephadex G-50、Bio-gel P6 DC凝胶进行分子筛层析,利用Macro-Prep Hrep S进行阳离子交换层析。对层析峰行Tris-Tricine
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