per1,per2 3′UTR双荧光素酶报告基因重组质粒的构建

来源 :化学与生物工程 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zengyufeng
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
构建了包含目的片段小鼠节律基因per1,per2 3′UTR全长的重组质粒,为初步分析转录后可能调控per1,per2基因的miRNAs提供了有效手段。用反转录试剂盒将从小鼠肝脏组织提取的RNA反转录得到cDNA,以获得的cDNA为模板PCR扩增per1,per2 3′UTR全长,经回收纯化、酶切后将目的片段定向克隆到PGL3-promoter质粒上,再经转化扩增挑取克隆进行菌落PCR,对获得的阳性克隆进行酶切鉴定并测序。PCR产物鉴定结果表明,目的片段per1,per2 3′UTR序列扩增成功;菌落PCR及单酶切鉴定结果表明,per1,per2 3′UTR已插入PGL3-promoter载体中;测序结果表明,per1,per2 3′UTR插入序列,插入方向正确。per1,per2 3′UTR双荧光素酶报告基因重组质粒的成功构建为进一步研究节律基因转录后的调控机制奠定了基础。
其他文献
市场经济、民主政治和法治政府杨海坤中国在本世纪最后二十年所取得的发展和进步是史无前例的.这种巨大的进步一是来源于对长期以来“左”的惨痛教训的反思,它是以“文革”这样
内燃机作为一种高效的动力源广泛应用在各种形式的车辆上,内燃机在提供动力的同时也会产生强烈的振动和噪声,影响了车辆的乘坐舒适性和行驶安全性。因此设计最佳化的动力总成悬
约翰·斯坦贝克的代表作《愤怒的葡萄》成功地运用了《圣经》隐喻来渲染气氛, 丰富其内涵。《圣经》的故事寓意和有关道德观念已融入作品的思想主题中, 同时, 作者在叙述结构和
目前新媒体的传播形式日益丰富,传播内容更加多样化,更加接地气,更加不拘一格,作为传统媒体的行业报如何充分利用新媒体的传播形式及其创新思维,将其融合到行业报为行业服务
本文对管材内高压成形(Internal high pressure forming)技术进行了研究,研究了整形过渡圆角工艺设计、内高压成形工艺曲线加载方式、内高压成形区长度与极限膨胀率,研究结果
在不少人眼里,内蒙古还仍是一个经济后发展的地区。但就在这里,一家于1998年才挂牌营业而且也许至今还鲜为人知的银行——包头市商业银行,在短短的几年间经历了一种梦幻般的
美国西进运动与中国西部开发是区域经济发展史上的两次壮举,是美中两国针对国内发展不平衡的状况所采取的应对措施。通过对二者的历史背景和演进过程进行分析后发现,西进运动
<正>备受瞩目的第64届戛纳电影节2011年5月11日晚在法国南部海滨城市戛纳正式开幕,世界各地片商的兵家必争之地戛纳电影节电影市场12日"开门营业"。对不少参展商来说,影片一
文章基于2003~2015年中巴贸易、投资和援助的时间序列数据,利用广义差最小二乘法实证检验了中巴合作对巴基斯坦经济的影响。结果表明:中国与巴基斯坦的双边贸易和对巴援助显
针对三相并网LLCL滤波器存在的固有谐振尖峰问题,提出4种基于LLCL滤波器的无源阻尼方法.在相同条件下,分别对4种LLCL滤波器在谐振尖峰的抑制能力、开关频率处陷波效果、阻抗