探讨富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对钛表面成骨细胞黏附、增殖、分化的影响,探讨PRFe作为生长因子来源对种植体-骨结合的促进作用。
方法实验组和对照组分别用含0.5% PRFe和不含PRFe的α-最低必须培养基,在钛片表面接种成骨细胞(每组每时间点设3个重复样本)。扫描电镜及激光扫描共聚焦显微镜分别观察接种24、72 h后细胞黏附及12、24 h后细胞骨架形态。甲基噻唑基四唑法测定培养1、3、5、7 d的细胞增殖情况;碱性磷酸酶活性检测诱导1、3、5、7 d的细胞分化情况;荧光实时定量PCR (quantitative real-time PCR ,qRT-PCR)测定诱导3和7 d成骨细胞核心结合因子α1 (core-binding factor α1,Cbfα1)和骨钙蛋白的基因表达。
结果扫描电镜及激光扫描共聚焦显微镜显示,随时间延长,实验组细胞形态较对照组更伸展,肌动蛋白排列更致密。培养1、3、5、7 d实验组细胞增殖(A值分别为0.299±0.002、0.517±0.004、0.810±0.002和1.203±0.011)均显著大于对照组(分别为0.198±0.003、0.399±0.002、0.588±0.002和0.897±0.005)(P< 0.05)。培养1、3、5、7 d实验组碱性磷酸酶A值(分别为0.162±0.004、0.289±0.001、0.491±0.006和0.647±0.005)均显著大于对照组(分别为0.121±0.003、0.191±0.006、0.252±0.004和0.365±0.012)(P< 0.05)。qRT-PCR显示,实验组Cbfα1和骨钙蛋白基因表达量(3 d:分别为1.50±0.04和3.37±0.17; 7 d:分别为1.94±0.06和3.92±0.04)均显著高于对照组(3 d:均为1; 7 d:分别为1.18±0.13和2.34±0.09)(P< 0.05)。
结论PRFe能有效促进成骨细胞在钛表面的黏附、增殖和分化。