变形链球菌耐氟菌ffh基因siRNA干扰序列的筛选鉴定

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目的 筛选鉴定变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因的siRNA干扰序列.方法设计合成4段21 bp的核酸[1],利用电穿孔方法转入UA159-FR使其与ffh基因序列靶向位点结合.通过RT-PCR 和Real-time PCR技术验证靶向沉默ffh基因的效果,筛选出最佳siRNA干扰序列.结果倒置显微镜观察细菌电转效果正常.转染12 h内除siRNA1外其他3对siRNA都可以抑制ffh基因的表达,而在转染超过12 h达到24 h后,只有siRNA2可以更稳定的抑制ffh基因的表达.结论 siR
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