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安丝菌素是一种有强抗肿瘤作用的天然产物，拟诺卡氏菌Nocardiopsis ansamitocini EGI80425作为安丝菌素的产生菌具有重要的研究价值，因此需要建立其遗传操作体系，并实施对该菌株的遗传改造。首先，通过优化菌丝体接合转移相关的培养时间、供受体比例和培养基中Mg2+浓度等，建立了效率为6.6×10-3的整合型载体pIB139的接合转移方法；在此基础上进一步调整相关条件，建立了效率为6.2×10-4的游离型质粒pJTU1278的接合转移方法。最后，利用游离型质粒对潜在的PKS竞争基因簇Cluster I和Cluster VII进行了缺失。结果显示，Cluster I缺失突变株CXY01中安丝菌素的产量为12.6 mg/L，相比野生型提高了95.3%；Cluster VII缺失突变株CXY02中安丝菌素产量为7.4 mg/L，相比野生型提高了15.2%。本研究建立了N. ansamitocini EGI80425的遗传操作体系，并在此基础上对该菌进行了基因组片段敲除，有效提升了安丝菌素产量，为利用N. ansamitocini大量产生安丝菌素奠定了基础。