反相高压液相色谱法测定恶臭假单胞菌腈水合酶活力

来源 :上海交通大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:songsiliang
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采用高压液相色谱法(HPLC)分析丙烯腈及其微生物酶法转化产物丙烯酰胺,配制两者的混合溶液做标准曲线,通过外标法定量,测定反应液中腈水合酶活力.实验结果表明,采用Nova-PakC18柱、以流速为1.6mL/min的甲醇-水溶液(体积比20:80)作流动相、采用210um紫外检测时两者分离度好.HPLC法与化学法相比具有准确、简单、快速、重现性好且灵敏度高等优点,适于批量样品的连续测定. Acrylonitrile and its enzymatic conversion product of acrylamide were analyzed by high pressure liquid chromatography (HPLC). The mixed solution of the two was prepared as a standard curve. The nitrile hydratase activity in the reaction solution was determined by external standard method. The experimental results show that with Nova-Pak C18 column, methanol-water solution (20:80 by volume) as mobile phase at a flow rate of 1.6mL / min and good resolution with 210um UV detection. Compared with the chemical method, the HPLC method is accurate, simple, rapid, reproducible and has the advantages of high sensitivity and is suitable for the continuous determination of batch samples.
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