两种植原体的PCR检测及其体系优化

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用已报道的植原体通用引物对葡萄黄化病和枣疯病植原体进行常规PCR及巢式PER检测,并对PCR反应体系进行优化。结果表明:常规PCR扩增出了1.5kb的特异片段,所需PCR模板DNA用量为20ng/μL;在PCR基础上的巢式PCR扩增出1.2kb的特异片段,所需PCR模板DNA用量为2pg/μL。检测灵敏度提高约10000倍。优化试验表明:25μL应体系中,MgCl2用量对扩增效果影响最大。最终最佳反应体系确立为:25mM MgCl2 1.7μL。2.5mM dNTP 1.8μL,5U/μL Taq酶可选用
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