抗人SUMO1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

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目的表达重组人SUMO1(small ubiquitin—related modifier1)蛋白并制备单克隆抗体。方法构建含人SUM01基因的重组表达质粒pET32a—HIS—SUM01,在大肠杆菌中表达重组蛋白HIS—SUM01;以纯化后的HIS—SUMO1蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术,通过ELISA和Western blot方法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,用免疫双向扩散法鉴定抗体Ig的类型及亚类;取一株筛选细胞按照常规方法制备腹水,利用Millipore抗体纯化试剂盒进行抗体纯
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