【摘 要】
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为探究紫杉醇联合他莫昔芬对人乳腺癌细胞的影响并初步研究其作用机制,体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,MTT法检测紫杉醇、他莫昔芬单独及联合使用对MCF-7细胞株的增殖抑制作用,计
【机 构】
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武汉城市学院 医学部,武汉 430083;武汉市第四医院 心血管内二科,武汉 430000;燕山大学 校医院,秦皇岛 066000
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为探究紫杉醇联合他莫昔芬对人乳腺癌细胞的影响并初步研究其作用机制,体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,MTT法检测紫杉醇、他莫昔芬单独及联合使用对MCF-7细胞株的增殖抑制作用,计算两药单独作用时的半数抑制浓度(inhibito-ry concentration 50,IC50)以及联合使用时针对靶细胞的联合指数(combination index,CI),评估两药的相互作用;显微镜下观察各组凋亡细胞形态学变化并摄片;FACS检测细胞的凋亡率和细胞周期变化;ELISA检测各组上清液CCL22、IL-10、TGF-β1的表达;Western blotting检测各组细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病2(B cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2)和 Bcl-2相关 X 蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)的表达水平.结果显示,联合用药组相较于单药组显著抑制肿瘤细胞的增殖(P＜0.05);紫杉醇联合他莫昔芬的CI＜1,提示联合用药具有协同抗肿瘤作用,且相较于单药组PCNA表达明显下降;荧光显微镜及FACS显示紫杉醇与他莫昔芬单药可诱导MCF-7凋亡,联合时作用增强;两药联合应用能阻滞细胞周期于G0/G1期,且相较于单药组Bcl-2表达下降、Bax表达增加;ELISA检测示联合用药组相较于单药组细胞培养上清液中CCL22、IL-10、TGF-β1表达水平均显著下降(均P＜0.05).以上结果提示,紫杉醇联合他莫昔芬可能通过下调免疫调节因子IL-10、TGF-β1和CCL22的表达发挥协同抗肿瘤作用.
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