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【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1550-1868(2014)09
质量控制作为实验室管理的一个重要内容,是保证实验数据和结果的准确可靠的重要基础,质量控制的对象应涵盖实验过程涉及到的所有环节和物资。培养基作为微生物学检验常用的重要物资其质量好坏可能直接影响最后的检测结果,所以更需要系统规范的验收和质控措施。
2013年国家卫生和计划生育委员会发布了《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求(GB4789.28-2013)》,并将于2014年6月1日开始正式实施,该标准增加了培养基质量控制方法和指标,对日常工作中如何实施培养基的质量控制提供了依据。只是对于其中的3.3.4款pH的测定和校正提出来讨论一下。
培养基的pH值控制不正确可能造成培养基不凝固、颜色异常、产生沉淀等,造成目标菌的分离鉴定困难,增加了工作量,降低了工作效率。3.3.4款中明确培养基的pH测定应使用pH计。某些培养基因为自身成分或者添加了指示剂等原因带有一定的颜色,如果使用比色法或精密试纸测量会因为培养基本身的颜色影响结果的判断,使用pH计可以避免,而且测量结果也准确,可以减少检测者对色彩的敏感度不一样带来的误差。新国标中提到培养基灭菌冷却至25℃时,pH应在标准pH±0.2范围内。但是在实际工作中,对于一些琼脂含量较高的培养基在25℃时已经凝固,用pH计无法直接测定。如何解决这个问题,笔者考虑有如下三种解决思路:一、提高培养基测定温度使其保持融化状态进行测定和校准。需要注意几点,1.测定前需要查看pH计说明书,确定其是否能够测定较高温度溶液;2.在测量和校准过程中应采取保温措施,保证培养基温度恒定,便于对测得的pH值进行校准。二、按待测培养基成分除琼脂成分外配制灭菌后,测定和调节pH,并将消耗的酸碱标准液的体积应用于平时工作中(见后文),不过现在实验室使用商品化的成品粉末培养基比较多,剔除琼脂成分比较困难。三、对于颜色较浅的液体培养基从减少工作量的角度可以根据实际情况采用比色法或精密试纸测量和校准。此外可以留意是否有测定固体样品pH的特殊仪器。
为了保证pH的准确,建议在灭菌后进行测量和校正pH操作。同时为了保证培养基在使用前的无菌状态,应注意过程中的无菌操作并尽量减少培养基暴露于空气中的时间。具体可以在进行该培养基验收时配制小包装的培养基,经过灭菌处理后冷却至某一温度,在恒溫状态下进行按3.3.4款所规定的酸碱溶液进行pH测定和校正,并记录培养基该体积V1所消耗的酸碱溶液的体积V2,可以得出一个V2/V1的常数,该常数可以考虑作为本批次培养基的一个pH校正常数应用到以后的配制过程中,由此可以减少一定的工作量,提高工作效率。
对于检测过程的质量控制应贯穿于整个检测过程,人机料法环都应该包含,对于培养基pH等的控制这类看似细微的环节,如果失控可能对检测结果带来重大影响,应该引起足够的重视。
质量控制作为实验室管理的一个重要内容,是保证实验数据和结果的准确可靠的重要基础,质量控制的对象应涵盖实验过程涉及到的所有环节和物资。培养基作为微生物学检验常用的重要物资其质量好坏可能直接影响最后的检测结果,所以更需要系统规范的验收和质控措施。
2013年国家卫生和计划生育委员会发布了《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求(GB4789.28-2013)》,并将于2014年6月1日开始正式实施,该标准增加了培养基质量控制方法和指标,对日常工作中如何实施培养基的质量控制提供了依据。只是对于其中的3.3.4款pH的测定和校正提出来讨论一下。
培养基的pH值控制不正确可能造成培养基不凝固、颜色异常、产生沉淀等,造成目标菌的分离鉴定困难,增加了工作量,降低了工作效率。3.3.4款中明确培养基的pH测定应使用pH计。某些培养基因为自身成分或者添加了指示剂等原因带有一定的颜色,如果使用比色法或精密试纸测量会因为培养基本身的颜色影响结果的判断,使用pH计可以避免,而且测量结果也准确,可以减少检测者对色彩的敏感度不一样带来的误差。新国标中提到培养基灭菌冷却至25℃时,pH应在标准pH±0.2范围内。但是在实际工作中,对于一些琼脂含量较高的培养基在25℃时已经凝固,用pH计无法直接测定。如何解决这个问题,笔者考虑有如下三种解决思路:一、提高培养基测定温度使其保持融化状态进行测定和校准。需要注意几点,1.测定前需要查看pH计说明书,确定其是否能够测定较高温度溶液;2.在测量和校准过程中应采取保温措施,保证培养基温度恒定,便于对测得的pH值进行校准。二、按待测培养基成分除琼脂成分外配制灭菌后,测定和调节pH,并将消耗的酸碱标准液的体积应用于平时工作中(见后文),不过现在实验室使用商品化的成品粉末培养基比较多,剔除琼脂成分比较困难。三、对于颜色较浅的液体培养基从减少工作量的角度可以根据实际情况采用比色法或精密试纸测量和校准。此外可以留意是否有测定固体样品pH的特殊仪器。
为了保证pH的准确,建议在灭菌后进行测量和校正pH操作。同时为了保证培养基在使用前的无菌状态,应注意过程中的无菌操作并尽量减少培养基暴露于空气中的时间。具体可以在进行该培养基验收时配制小包装的培养基,经过灭菌处理后冷却至某一温度,在恒溫状态下进行按3.3.4款所规定的酸碱溶液进行pH测定和校正,并记录培养基该体积V1所消耗的酸碱溶液的体积V2,可以得出一个V2/V1的常数,该常数可以考虑作为本批次培养基的一个pH校正常数应用到以后的配制过程中,由此可以减少一定的工作量,提高工作效率。
对于检测过程的质量控制应贯穿于整个检测过程,人机料法环都应该包含,对于培养基pH等的控制这类看似细微的环节,如果失控可能对检测结果带来重大影响,应该引起足够的重视。