多发性骨髓瘤患者成骨细胞培养及调控

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目的 研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓来源成骨细胞的增殖分化和成骨潜能,比较蛋白酶体抑制剂硼替佐米及MM患者血清对成骨细胞的影响.方法 以20例MM患者和10名健康正常人为研究对象,采用骨髓培养法从骨髓中培养并纯化出成骨细胞,进行成骨细胞计数;成骨细胞传代培养4周后,行VonKossa's钙染色,进行成骨细胞钙结节计数;在MM患者组及正常对照组成骨细胞中分别加入硼替佐米及MM患者血清,对比其细胞生物学特性的变化.采用流式细胞术检测MM患者成骨细胞抗体CD34、CD138、CD45的表达,采用ELISA法测定血清IL-7水平,采用RT-PCR法检测各组培养细胞中骨形成蛋白2(BMP2)的表达.结果 ①成骨细胞计数(单位为×104/ml):MM患者组(6.3±1.5)较正常对照组(8.2±2.6)减少(P<0.05);MM患者组中,加硼替佐米组(8.9±2.1)较不加硼替佐米组(7.8±3.0)明显增多(P<0.05),但加入MM血清与否差异无统计学意义[(5.9±1.6)对(6.3±1.5),P>0.05];正常对照组中,加入MM血清组(7.4±1.1)较不加MM血清组(8.2±2.6)有所减少(P<0.05).②成骨细胞钙结节计数:MM患者组中,加硼替佐米组(8.8±1.9)多于不加硼替佐米组(6.1±1.6)(P<0.05),但少于正常对照组(15.8±2.2)(P<0.05).③各组成骨细胞均不表达CD138、CD45、CD34.④MM患者组血清IL-7水平(2.07±0.71)高于正常对照组(1.62±0.15)(P<0.05).⑤加硼替佐米MM患者组及正常对照组均可表达BMP2 mRNA,不加硼替佐米的MM患者组BMP2 mRNA无明显表达.结论 骨髓培养法可用于体外培养MM患者成骨细胞.与正常对照者比较,MM患者成骨细胞的增殖分化及成骨能力明显减弱.硼替佐米有促进成骨细胞增殖分化及成骨的能力;MM患者血清可抑制成骨细胞的增殖分化。

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