戊二醛法将三聚氰胺(Melamine)与载体蛋白进行偶联制备免疫抗原Melamine-BSA及包被抗原Melamine-OVA。对人工合成抗原进行紫外扫描,其紫外扫描谱图与载体蛋白及三聚氰胺的图谱有明显的差异,初步显示载体蛋白与三聚氰胺偶联成功。进一步分析Melamine-BSA中Melamine与BSA的摩尔比,复合物中三聚氰胺与BSA的摩尔比为8.56∶1。用免疫抗原Melamine-BSA腹腔免疫BALB/c小白鼠,获得抗三聚氰胺的多克隆抗体,间接非竞争ELISA分析所得抗血清的效价达10000以上。间接竞争ELISA显示所制备的抗血清能有效识别三聚氰胺,与氰脲酸、三聚氰酸酰胺、三聚氰酸二酰胺无交叉反应。利用自制抗体建立牛奶中三聚氰胺的间接竞争ELISA检测方法,对奶样作0.1μg/mL,1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL,500μg/mL和1000μg/mL六个加标浓度的回收率在70.30%113.59%。