【摘 要】
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目的研究有效的猪链球菌病疫苗。方法采用PCR方法,以四川株、参考菌株和江苏分离株猪链球菌2型基因组DNA为模板扩增溶血素基因,克隆至PMD18-T载体。提取阳性质粒,进行PCR和酶
【机 构】
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中国动物卫生与流行病学中心,扬州大学兽医学院
【基金项目】
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国家科技攻关计划资助项目(2004BA519A53),青岛市科技发展计划项目(05-2-JC-78)
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目的研究有效的猪链球菌病疫苗。方法采用PCR方法,以四川株、参考菌株和江苏分离株猪链球菌2型基因组DNA为模板扩增溶血素基因,克隆至PMD18-T载体。提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定。经测序正确后,构建原核表达载体pET32a-SLY,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG进行诱导。结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量约为43ku的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western-blotting)分析证实,该重组蛋白与SS2-6阳性血清发生特异性反应。
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