【摘 要】
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目的:建立毛细管区带电泳(CZE)方法用于评价曲妥珠单抗类似物的电荷异质性。方法:实验中选用甲基纤维素(MC)和尿素作为缓冲液添加剂以改善曲妥珠单抗类似物电荷变体间的分离;
【机 构】
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烟台大学药学院; 绿叶制药集团有限公司长效和靶向制剂国家重点实验室;
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目的:建立毛细管区带电泳(CZE)方法用于评价曲妥珠单抗类似物的电荷异质性。方法:实验中选用甲基纤维素(MC)和尿素作为缓冲液添加剂以改善曲妥珠单抗类似物电荷变体间的分离;0.1 mol·L-1盐酸溶液与0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液前处理冲洗以有效减少单抗吸附。本文考察了运行缓冲液pH及浓度、分离电压、温度、添加剂对主峰与酸、碱变体峰分离度的影响。优化电泳条件为:5 kPa进样10 s,分离温度为15℃,分离电压为20 kV,运行缓冲液为600 mmol·L-1ε-氨基己酸(EACA)pH 5.4,包含0.1%MC和4 mol·L-1尿素溶液。结果:在优化的实验条件下,曲妥珠单抗类似物与其电荷变体能够得到较好分离,并且主成分的相对百分含量与迁移时间的日内精密度均小于2%。结论:本方法操作简单,分离度良好,成本较低,可以满足曲妥珠单抗类似物电荷异质性的分析要求。
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