【摘 要】
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目的建立稳定高效的成年大鼠心室肌细胞分离与培养方法。方法成年SD大鼠麻醉后,迅速开胸取心,将主动脉连接于Langendorff装置上进行逆向灌流,用0.8 mg/m LⅡ型胶原酶和0.1 mg
【机 构】
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华南理工大学生物科学与工程学院/生物医药前孵化器研究中心/广东省发酵与酶工程重点实验室
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目的建立稳定高效的成年大鼠心室肌细胞分离与培养方法。方法成年SD大鼠麻醉后,迅速开胸取心,将主动脉连接于Langendorff装置上进行逆向灌流,用0.8 mg/m LⅡ型胶原酶和0.1 mg/m L蛋白酶双酶灌注消化分离心肌细胞,采用自然沉降法纯化心室肌细胞,一部分细胞用改良的M199培养基进行细胞培养,另一部分使用台盼蓝染色进行细胞活性检测并计数,同时使用激光共聚焦显微镜观察细胞收缩及钙瞬变。结果本方法可获得（81.9±2.2）%具有活性的成年大鼠心室肌细胞,每只SD大鼠心脏的细胞产量可达（
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