利用核酸外切酶Ⅲ体外缺失法构建PTLIL-2△n系列缺失质粒

来源 :同济医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zqszc
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PTLIL-2是一个含有人白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)cDNA克隆的细菌质粒,含有该质粒的宿主菌虽然表达IL-2,但表达效率不理想。我们利用核酸外切酶在Ⅲ(exonucleaseⅢ,ExoⅢ),采用两种不同的方法,缺失IL-2 cDNA 3′端非编码顺序,获得了含有IL-2片段长度不同的系列缺失质粒PTLIL-2△n;并从中筛选出数个较高效表达IL-2的质粒。该两法简便易行,在基因工程领域中有一定推广价值。 PTLIL-2 is a bacterial plasmid containing the human interleukin-2 (IL-2) cDNA clone. The host strain containing this plasmid expresses IL-2 but the expression efficiency is not satisfactory. Using exonuclease Ⅲ (ExoⅢ), two different methods were used to delete the non-coding sequence of IL-2 cDNA at the 3’end of exonuclease Ⅲ, and a series of deletion plasmids containing different lengths of IL-2 fragment, PTLIL-2 △ n; and selected from several more efficient expression of IL-2 plasmid. The two methods are simple and easy to implement and have certain promotional value in the field of genetic engineering.
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