【摘 要】
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目的 建立一种定量检测肝细胞癌（HCC）组织肝细胞核因子4α（HNF4α）mRNA的方法.方法 取手术获得的HCC组织16例,提取总RNA,逆转录PCR扩增获得全长HNF4αmRNA对应cDNA产物,经TA克隆
【机 构】
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解放军第302医院肝脏肿瘤诊疗与研究中心
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目的 建立一种定量检测肝细胞癌（HCC）组织肝细胞核因子4α（HNF4α）mRNA的方法.方法 取手术获得的HCC组织16例,提取总RNA,逆转录PCR扩增获得全长HNF4αmRNA对应cDNA产物,经TA克隆后,测序确认.根据获得序列,设计检测HNF4αmRNA引物及MGB荧光探针.以体外转录HNF4αmRNA为标准品,建立一步法逆转录荧光定量PCR检测方法,同时设定β-actin mRNA为内参对照,最终计算得到组织HNF4αmRNA水平.采用免疫组化染色检测HNF4α蛋白表达,比较HNF4αmRNA
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