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目的探究精子相关抗原9(SPAG9)在膀胱癌细胞中的表达量以及与细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的关系和作用机制。方法以人膀胱上皮细胞SV-HUC-1为对照,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测SPAG9在膀胱癌T24、J28、RT4细胞系的表达量;转染siRNA沉默膀胱癌T24细胞中SPAG9基因的表达,细胞分为对照组、转染无义组、siRNA-SPAG9组,MTT实验检测干扰SPAG9基因表达对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Transwell法检测细胞的迁移、侵袭能力; Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白水平。结果与正常上皮细胞SV-HUC-1比较,SPAG9在膀胱癌T24、J28、RT4细胞中的表达量显著上调,其中以T24细胞最为明显;与对照组比较,siRNA-SPAG9组细胞中SPAG9的表达量显著降低(P <0. 05)。沉默SPAG9表达显著抑制细胞的增殖(P <0. 05),促进其凋亡(P <0. 05),抑制细胞的侵袭、迁移能力(P <0. 05),显著下调PCNA、Ki-67、Bcl-2、MMP-2、MMP-9的蛋白水平(P <0. 05),显著上调Bax蛋白表达量(P <0. 05)。结论 SPAG9在膀胱癌细胞中高表达;沉默SPAG9可能通过调控细胞恶性表型相关蛋白的表达,参与膀胱癌细胞生物学特性的调节过程,为膀胱癌的治疗提供新的靶点。