猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅠA蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

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【摘要】

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以猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）血清10型标准株ApxⅠ天然外毒素为免疫抗原，接种Balb／c小鼠；设计编码ApxⅠN一端具有保护性抗原表位apxIA基因（1149bp）的引物，构建原核表达载体pET-32a-apx

【作者】

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王海丽葛长城徐公义赵德明

【机构】

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聊城职业技术学院聊城市畜禽疫病诊疗工程技术研究中心,中国农业大学

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

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2011年12期

【关键词】

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胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体 ApxⅠ A 小鼠 Actinobacillus pleuropneumoniae monoclonal antibody

【基金项目】

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山东省教育厅科技计划项目（J09LC68）,聊城市科技攻关计划项目（20082048）,2010年山东省高校优秀青年教师国内访问学者项目（王海丽）,聊城职业技术学院重点项目（2011LZYK06）

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以猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）血清10型标准株ApxⅠ天然外毒素为免疫抗原，接种Balb／c小鼠；设计编码ApxⅠN一端具有保护性抗原表位apxIA基因（1149bp）的引物，构建原核表达载体pET-32a-apxⅠA，转化至E-coliBL21，获得分子质量约为41ku的rApxⅠA作为包被抗原，用间接ELISA方法筛选单克隆融合细胞上清，共获得2株稳定分泌抗ApxⅠA蛋白mAb的杂交瘤细胞系，亚类鉴定分别为IgG3、IgG2a，2株mAb能特异性地识别ApxⅠA蛋白，为ApxⅠA诊断试剂的研究奠定了基

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