通过蛋白质组学研究探讨高氧暴露后幼鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）的损伤机制。

将早产SD大鼠原代AECⅡ细胞分为常氧组和高氧组，分别置于常氧（21%O₂）和高氧（95%O₂）中培养24 h，于倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变，用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测凋亡相关蛋白Bcl-2、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）表达水平，以保证高氧模型的成功建立；收集AECⅡ细胞总蛋白，采用串联质谱标签（TMT）标记定量蛋白质组技术检测其蛋白谱，以高氧暴露后差异倍数（FC）>1.5、P<0.05双标准筛选差异蛋白，并对其进行生物信息学分析；依据分析结果，将AECⅡ细胞分为常氧组、高氧组及高氧+MW167组〔细胞置于含95%O₂的氧舱前30 min加入10 μmol/L的γ泌肽酶抑制剂MW167〕，培养24 h后，用CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测细胞活性，用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Notch通路下游蛋白毛状蛋白（Hes1）和促凋亡蛋白Bax的mRNA表达。

①光镜下观察，常氧组细胞明显增殖、延展，胞质颗粒物质丰富；高氧组细胞核固缩，胞质内颗粒物质明显减少。与常氧组相比，高氧组细胞caspase-3蛋白表达明显增高，Bcl-2蛋白表达明显降低（caspase-3/GAPDH：1.352±0.086比0.769±0.080，Bcl-2/GAPDH：0.614±0.060比1.361±0.078，均P<0.01）。②蛋白质组学鉴定出差异蛋白162个，其中高氧暴露后上调的差异蛋白主要参与各种刺激的应答，定位于胞外区；高氧暴露后下调的差异蛋白主要与物质合成相关，定位于细胞基质区域。对差异蛋白通路富集分析（KEGG Pathway分析）结果表明，细胞色素P450代谢、线粒体氧化磷酸化、Notch信号通路等可能与高氧损伤AECⅡ细胞机制相关。③与常氧组比较，高氧组AECⅡ细胞活性显著下降，Hes1、Bax mRNA表达水平明显升高〔细胞活性（A值）：0.060±0.003比1.058±0.017，Hes1 mRNA（2^-ΔΔCt）：2.235±0.606比1.144±0.107，Bax mRNA（2^-ΔΔCt）：2.210±0.240比1.084±0.096，均P<0.05〕。与高氧组比较，高氧+ MW167组细胞活性明显升高，Hes1、Bax mRNA表达水平明显下降〔细胞活性（A值）：0.271±0.025比0.060±0.003，Hes1 mRNA（2^-ΔΔCt）：0.489±0.046比2.235±0.606，Bax mRNA（2^-ΔΔCt）：1.289±0.041比2.210±0.240，均P<0.05〕。

高氧肺损伤幼鼠AECⅡ细胞损伤机制可能与细胞色素P450代谢、线粒体氧化磷酸化等途径的改变以及Notch信号通路的激活有关。