【摘 要】
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目的构建表达重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)的巴斯德毕赤酵母工程细胞,实现rhBSP的酵母胞外分泌性高表达.方法通过PCR扩增获得人BSP基因后,构建重组表达载体pPICZaA-hbsp,经电转
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目的构建表达重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)的巴斯德毕赤酵母工程细胞,实现rhBSP的酵母胞外分泌性高表达.方法通过PCR扩增获得人BSP基因后,构建重组表达载体pPICZaA-hbsp,经电转化导入到毕赤酵母GS115菌中,获得GS115/pPICZaA-hbsp工程菌,通过Zeocin高抗性筛选和摇瓶发酵筛选出高表达rhBSP的菌株,并进行高密度发酵提高表达量.结果 rhBSP分子量接近66 000,产物可达上清液总蛋白的80%,浓度约0.248 g/L.结论基因工程菌GS115/pPICZaA-hb
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