【摘 要】
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目的研究在缺氧环境下靶向针对解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)的短发夹状RNA(shRNA)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法针对ADAM17设计4个特异性的ADAM17-shRNA,经电穿孔法转
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目的研究在缺氧环境下靶向针对解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)的短发夹状RNA(shRNA)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法针对ADAM17设计4个特异性的ADAM17-shRNA,经电穿孔法转染MCF-7细胞。缺氧条件下培养细胞。试验分为:对照组(空白磷酸盐缓冲液)、无义序列组(转染无义序列ADAM17-shRNA)和shRNA转染组(转染ADAM17-shRNA,选择沉默ADAM17基因效率最高的shRNA用于后续试验)。分别采用实时荧光定量PCR、iCELLigence、流式细胞仪检测细胞ADAM17mRNA的表达水平、细胞增殖活性和细胞周期变化。结果 4个shRNA转染组对MCF-7细胞的ADAM17基因表达均有沉默作用,与对照组及无义序列组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),尤以shRNA1219抑制率最高(F=5.11,P<0.01)。shRNA转染组的细胞生长速度和增殖活性较对照组和无义序列组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。shRNA转染组的绝大多数细胞停留在G0/G1期(73.35±2.45),与对照组(62.56±2.35)、无义序列组(62.68±1.20)相比较,差异有统计学意义(P<0.05),细胞周期进展明显延缓。结论 ADAM17-shRNA在缺氧条件下抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖。
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